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篩選具有抑制人類結腸癌細胞HT-29之乳酸菌

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972588

005		20150914170543.0
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200	1	\|a篩選具有抑制人類結腸癌細胞HT-29之乳酸菌\|f陳仲媛撰
210		\|a[台中市]\|c[陳仲媛]\|d民104
215	0	\|a[13],97葉\|c圖\|d30公分
300		\|a英文題名:Screening of Lactic Acid Bacteria Inhibit HumanColonic Carcinomal Cell Line HT-29
300		\|a指導教授:謝尤敏,蔡政志
320		\|a含參考書目
328		\|a碩士論文--靜宜大學食品營養學系
330		\|a大腸結腸癌的全球發生率隨著年齡的增加而提高，飲食習慣是重要因素之一。許多研究證實，乳酸菌降低大腸癌的發生率。本研究目的為探討乳酸菌菌體和上清液對人類大腸癌細胞株HT-29生長抑制。乳酸菌菌株來源為生物資源保存和研究中心（Bioresource Collection and Research Center; BCRC）和蔬菜醃漬物之分離株。乳酸菌上清液調節pH至7，以MTT方式測定對HT-29細胞存活率的影響，以乳酸脫氫酶活性分析乳酸菌菌體和上清液是否影響HT-29細胞細胞膜完整性，以及用酵素連結免疫吸附分析法測定細胞激素介白素-4、介白素-6、介白素-8、介白素-10和腫瘤壞死因子-α的含量，並以西方墨點法測定細胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的含量，並測定細胞一氧化氮的產量。為了瞭解乳酸菌菌株對宿主潛在的健康作用，乳酸菌菌株於模擬胃腸道中測定其存活率、粘附HT-29細胞分析和抑制β-葡萄糖醛酸酶的活性。結果顯示。七株菌(BCRC 17010、10696、14759、14625、PM 150、PM 153和PM 177)皆不能抑制β-葡萄糖醛酸酶的活性。PM 153之黏附能力和模擬腸胃道試驗效果最佳，且可抑制發炎細胞激素介白素-4和介白素-8，PM 153與HT-29細胞培養作用8小時後，能誘導HT-29細胞分泌一氧化氮。BCRC 17010在菌數量109 cfu/ml與HT-29細胞培養作用8小時後之Bax/Bcl-2比值為1.19>1，與其他組有顯著差異 (p<0.05)，表示BCRC 17010可能藉由Bax / Bcl-2蛋白之內源性途徑誘導細胞凋亡對HT-29細胞有促凋亡作用，並抑制發炎細胞激素介白素-4 和介白素-8。BCRC 14625在菌數量109 cfu/ml下與HT-29細胞培養4、8和12小時LDH活性顯著上升 (p<0.05)，會對HT-29細胞膜造成傷害，具有細胞毒性，且在菌數量109 cfu/ml與HT-29細胞作用8小時後，會誘導細胞分泌NO。四株乳酸菌(BCRC 17010、14625、PM 153和PM 177)上清液並無誘導細胞凋亡作用，且不誘導HT-29細胞分泌介白素-4、6、8、10和腫瘤壞死因子- α。乳酸菌菌體比上清液更有效去抑制發炎激素介白素-4和介白素-8，緩解發炎反應，預防大腸癌之發生。
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